標本采集和運送方法
(一)血標本。
1.采集出疹后28天內病例靜脈血2~3ml,加入到無菌試管中,標明采集日期和病例姓名、編號。
2.有條件地區可用1500rpm/20分鐘離心機分離血清。如果沒有離心機,在室溫下凝固分離血清,或冷藏條件下放置,直到血清完全析出。
3.在無菌條件下,將血清移至外螺旋蓋帶墊圈的無菌管中,避免吸到紅血球。
4.血清標本運送前應在2~8℃保存,如果7天內不能運送的,應置-20℃以下保存,避免反復凍融。全血標本不能凍結。
5.填寫完整的標本送檢表,送檢表上要注明病例編號。
6.對出疹3天內麻疹IgM抗體陰性者,可于出疹后4-28天再采集第2份血標本。
(二)病原學標本。
采集病原學標本的要求是在暴發疫情早期,至少采集2例(<10例病例的暴發)或5例(≥10例病例的暴發)新發病例的病原學標本。
1.鼻咽拭子標本
(1)采集出疹前5天至出疹后5天的鼻咽拭子標本。
(2)使用的棉拭子和試管等應滅菌。
(3)用無菌棉拭子適度用力在鼻咽部和咽喉部擦拭,獲得上皮細胞。
(4)把拭子放入有外螺旋蓋并裝有2ml病毒運輸液的凍存管中。
(5)病毒運輸液有商業成品可用。常用的病毒運輸液包括:
pH 7.4~7.6的Hank’s液:在90ml蒸餾水中加入10mlHank’s,然后加入10ml牛血清和0.2ml 0.4%酚紅溶液,過濾消毒。加1ml青/鏈霉素溶液。分裝到無菌管中,于4℃儲存備用。
組織培養液:DMEM液加入青/鏈霉素使其終末濃度分別為500~1000IU/ml和500~1000ug/ml,加入胎牛血清使其終末濃度為2%,加入谷氨酰胺至濃度為1%;加入7.5%的NaHCO3調節pH至7.4~7.6。
2.尿標本
(1)采集出疹前5天至出疹后5天內的尿標本10~50 ml。尿液應收集在滅菌容器中,2~8℃保存。
(2)尿中的脫落上皮細胞含有麻疹病毒,通常應在24小時內離心。4℃,轉速500g(約1500 rpm),離心5分鐘。
(3)棄上清,并用2~3ml病毒運輸液懸浮沉淀,置于有外螺旋蓋的凍存管中。
(4)在離心懸浮沉淀前不要冷凍尿液。
二、標本運送
(一)血標本。
1.標本采集后應在48小時內送到實驗室,嚴防標本污染或容器滲漏。標本標簽應清晰、防水。
2.標本運送時附帶標本送檢表,送檢表上要注明病例編號。安排運送日期并通知實驗室,說明標本送達時間。
(二)病原學標本。
1.鼻咽拭子、尿液等病原學標本采集后應立即置2~8℃保存。尿液離心后重懸的沉淀可在2~8℃保存。
2. 病原學標本應盡快送達省級麻疹實驗室。48小時內能送達的,可在2~8℃保存,否則-70℃保存。無-70℃保存條件者,可在-20℃保存,但要在1周內送達。在-70℃條件下保存的標本,1個月內送達省級麻疹實驗室。
3.標本應在2~8℃運輸,嚴防標本污染或容器滲漏。
4.標本保存和運送過程應避免日光照射。
5.其他送檢要求與血清標本相同。
相關鏈接:
