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    主要依靠流行病學史（發病前2-3周有與腮腺炎患者接觸史或當地有本病流行）、腮腺和／或鄰近腺體腫大，或伴有睪丸炎、卵巢炎、腦炎等臨床癥狀（詳見臨床表現部分）作出臨床診斷，但確診或對非典型或亞臨床型感染的診斷，必須通過血清學和病原學檢查。
    1．近年來大多采用ELISA法檢測患者急性期血清中有否抗腮腺炎病毒特異性1gM抗體，以期做到早期快速診斷。    
    2．以EL1SA法檢測患者的雙分血清（間隔24周），抗腮腺炎病毒特異性IgG抗體有4倍或4倍以上增高者，判斷為陽性。
    3．在發病早期采取患者唾液或尿液、腦脊液、血液標本，及時接種雞胚或人胚腎等敏感細胞，進行病毒分離試驗，病毒分離陽性標本常用紅細胞吸附抑制試驗或血凝抑制試驗鑒定其是否為腮腺炎病毒。
臨床診斷結合1.急性期血清中特異性IgM抗體陽性(前提是1個月內未接種過腮腺炎減毒活疫苗），或2．雙分血清特異性IgG抗體效價有4倍或4倍以上增高，或3．腮腺炎病毒分離陽性。即可做出確診。